作者:依利特 來源:液相銷售 2025-12-22 10:36:48
液相色譜柱是 HPLC 分離的 “核心戰(zhàn)場(chǎng)”,選對(duì)色譜柱,復(fù)雜樣品也能 “一鍵分開”。不同樣品性質(zhì)、分析場(chǎng)景對(duì)應(yīng)的色譜柱類型天差地別 —— 今天就從通用分析、特殊樣品、行業(yè)專用三個(gè)維度,教你精準(zhǔn)匹配色譜柱。
一、通用分析柱:實(shí)驗(yàn)室 “萬能款” 怎么挑?
常規(guī)有機(jī)化合物分析,優(yōu)先選這些 “百搭款”:
新手閉眼入Supersil 填料分析柱:高純度多孔球形硅膠,耐酸耐堿耐中性,適配食品、藥品等多數(shù)常規(guī)樣品,分離效率和穩(wěn)定性雙在線;
高 pH 場(chǎng)景選Hypersil BDS 分析柱:堿鈍化硅膠技術(shù),殘留硅羥基少,特別適合堿性化合物,峰形規(guī)整、定量精準(zhǔn);
超高效需求用Supersil 1.8/3um UHPLC 色譜柱:超純多孔球形硅膠,分離效率高、壽命長,適配水性和極性化合物,尤其適合 UHPLC 系統(tǒng)。
二、特殊樣品:生物、強(qiáng)酸堿樣品的 “專屬柱”
遇到蛋白、糖、強(qiáng)酸堿樣品,得用 “定制款”:
蛋白分離選SinoChrom 蛋白質(zhì)柱:300? 孔徑高純硅膠,搭配 ODS-AP/CN/C4 鍵合相,適配多種蛋白及生物樣品,分離效果優(yōu);
糖 / 有機(jī)酸分析用Amber 糖柱:支持 H?/Ca2+ 等多種離子形態(tài),兼容水流動(dòng)相,適合發(fā)酵產(chǎn)物、果汁中糖和有機(jī)酸的分離;
強(qiáng)酸堿樣品沖SinoPak BEH 分析柱:雜化硅膠基質(zhì),pH 范圍寬至 1.0-12.5,耐極端條件,適配強(qiáng)酸性 / 堿性化合物。
三、行業(yè)專用柱:精準(zhǔn)匹配法規(guī)與檢測(cè)需求
醫(yī)藥、食品等行業(yè)有專屬檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),對(duì)應(yīng)的色譜柱得 “對(duì)號(hào)入座”:
人參檢測(cè)用人參專用柱:適配 2015 版中國藥典,專門分離人參皂苷 Rg1、Re、Rb1,直接滿足質(zhì)控需求;
抗生素分析選Sephadex G-10 葡聚糖凝膠柱:按中國藥典標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì),專用于頭孢類藥物中高分子聚合物雜質(zhì)檢測(cè);
三聚氰胺檢測(cè)用三聚氰胺專用柱:針對(duì)性分離三聚氰胺,適配化工、建材等行業(yè)的質(zhì)量監(jiān)控。
四、“輔助裝備”:保護(hù)柱 + 制備柱,延長壽命 + 放大生產(chǎn)
別忽略色譜柱的 “搭檔”:
日常用佳杰分析柱保護(hù)柱:10mm 可換柱芯,攔截污染物,直接延長主柱壽命,性價(jià)比拉滿;
中試 / 生產(chǎn)選動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱(DAC 柱):低壓系統(tǒng) + 二級(jí)密封,適配醫(yī)藥、食品的分離純化,適合放大生產(chǎn);
制備級(jí)需求用半制備 / 制備型液相色譜柱:高壓勻漿填充,分離效率與分析柱一致,滿足從小試到量產(chǎn)的制備需求。
選色譜柱的核心是 “匹配樣品性質(zhì) + 分析場(chǎng)景”,不同品牌柱的鍵合相、孔徑差異會(huì)直接影響分離效果。按需選型,既能省成本,又能讓檢測(cè)結(jié)果更精準(zhǔn)。 增加3條常見問題,一問一答形式'

表1.HPLC色譜柱場(chǎng)景化選型表
常見問題(FAQ)
Q1: C18柱似乎常用,是不是所有樣品都優(yōu)先考慮C18柱?
A: 并非如此。C18(ODS)柱因其出色的疏水性和廣泛的適用性,確實(shí)是通用性強(qiáng)的反相色譜柱,適用于大多數(shù)非極性至中等極性化合物。但對(duì)于強(qiáng)極性化合物(如有機(jī)酸、糖類),其保留可能過弱;對(duì)于強(qiáng)堿性化合物,硅膠基質(zhì)C18柱可能導(dǎo)致峰拖尾。因此,需根據(jù)樣品極性、酸堿性選擇:強(qiáng)極性樣品可考慮C8、C4、苯基柱或HILIC柱;堿性樣品優(yōu)選經(jīng)端基封尾或采用特殊鈍化技術(shù)(如BDS)的C18柱;強(qiáng)酸/堿樣品則需考慮寬pH耐受的雜化顆粒柱。
Q2: 保護(hù)柱是否真的有必要?如何選擇匹配的保護(hù)柱?
A: 對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)樣品(如生物體液、中藥提取物、食品 homogenate)或日常頻繁使用的系統(tǒng),保護(hù)柱非常必要。它能有效攔截顆粒雜質(zhì)和強(qiáng)吸附性污染物,保護(hù)價(jià)格昂貴的主柱,顯著延長其壽命并保持柱效穩(wěn)定。選擇保護(hù)柱的核心原則是 “與主柱完全匹配” :填料類型(如C18)、粒徑和孔徑應(yīng)與主柱一致。例如,使用3μm的分析柱,就不應(yīng)選擇5μm填料的保護(hù)柱,以免造成額外的峰展寬。
Q3: 新色譜柱使用前需要活化嗎?如何正確進(jìn)行平衡?
A: 是的,新柱或長期保存后重新使用的色譜柱需要充分的平衡和活化,以確保性能重現(xiàn)。切勿直接使用保存溶劑(如甲醇或乙腈)進(jìn)行樣品分析。標(biāo)準(zhǔn)流程是:
沖洗:用5-10倍柱體積的保存溶劑(如甲醇)沖洗,置換柱內(nèi)的儲(chǔ)存液。
轉(zhuǎn)換:用10-20倍柱體積的初始流動(dòng)相(或高比例水相)緩慢過渡,將柱子轉(zhuǎn)換到分析體系中。
平衡:在初始分析比例下,以分析流速或稍低流速,持續(xù)沖洗至少30分鐘或直到基線、壓力和峰形穩(wěn)定。使用電化學(xué)檢測(cè)器(如ECD)或LC-MS時(shí),平衡時(shí)間需更長。
正確的平衡能確保固定相與流動(dòng)相充分作用,獲得穩(wěn)定可靠的保留時(shí)間和峰形。