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當污染來自儀器內部，你的每一步清洗都至關重要。

通過前三期的排查，如果已確認污染來自儀器系統內部，那么真正的挑戰才開始。儀器內部的污染更為隱蔽和頑固，需要系統性的深度清洗。本期將直擊核心，帶你逐一攻克色譜柱、流路與檢測器這三大內部污染重災區。

排查總綱：由表及里，循序漸進

處理系統內部污染，必須遵循科學的順序，建議遵循以下流程圖所示的路徑，效率高：

第一步：色譜柱污染排查與清洗

色譜柱是污染物容易滯留并緩慢釋放的部位。

污染類型判斷：

殘留污染：前次樣品中強保留組分未完全洗脫。

固定相流失/污染：填料降解或被不可逆吸附的雜質污染。

排查與清洗操作：

1.  初步沖洗判斷：連續進樣5-10針強溶劑（如高比例甲醇），觀察目標鬼峰的峰面積是否逐針減小。若減小，則很可能是殘留污染，持續沖洗可能解決。

2.  強力清洗程序：參考您購買的色譜柱使用說明中的深度清洗程序進行清洗。

3.  終驗證：執行一次系統空白（空針）測試。若鬼峰依然存在且未見減弱，則基本可排除色譜柱是唯一污染源，需進入下一步排查。

防患于未然：

如何保護您昂貴的色譜柱？完成上述深度清洗后，如何避免分析柱再次成為污染“重災區”？有效且經濟的方法是：在分析柱前加裝一支保護柱。它如同色譜系統的“前置過濾器”，能主動截留樣品基質和流動相中的強保留雜質、顆粒物，防止其進入并污染核心的分析柱。

依利特保護柱核心價值：

將保護柱納入日常分析流程，是從根本上降低維護頻率、確保數據重現性的明智選擇。

第二步：樞紐地帶——進樣閥與流路清洗

進樣閥的定量環、針座、流路切換閥是污染物交叉吸附和滋生的溫床。

關鍵清洗操作：

1.  手動沖洗進樣閥：

將進樣閥置于“Load”和“Inject”位置，分別使用注射器吸取純甲醇或異丙醇，反復沖洗樣品環（Loop）接口和進樣針座。

2.  利用儀器在線沖洗功能：

大多數液相色譜儀的軟件中都有“閥清洗程序”或“針清洗程序”。設置用強溶劑（如異丙醇）對進樣針和閥內部進行多次、長時間的高強度沖洗。

依利特Kromstation軟件“針清洗”程序界面，點擊注射器排氣即可進行進樣針和閥的清洗

3.  排查連接管路：

檢查泵到進樣閥、進樣閥到色譜柱之間的管路。如果長期使用，更換為新管路，再觀察鬼峰情況。

第三步：檢測器深度清洗

污染物終在此被檢測，流通池或離子源本身的污染會直接產生高背景噪音和鬼峰。

請參考儀器廠家給出的清洗建議方案，謹慎進行檢測器的深度清洗。

重要驗證步驟：

完成所有清洗后，更換一根已知絕對干凈、性能良好的色譜柱進行終測試。如果鬼峰消失，證明原色譜柱是主要污染源；如果鬼峰仍存在，則表明儀器流路或檢測器仍有頑固污染，可能需要更專業的維護。

特別提醒：別把“基線漂移”誤當鬼峰

在梯度洗脫中，流動相比例變化本身會引起基線上升或下降，形成類似寬峰的漂移，容易被誤判為鬼峰。

真正鬼峰是尖銳的峰形；而梯度基線漂移是平滑、連續的變化，且與梯度程序時間高度相關。處理方法：    

1.  使用更高純度的溶劑，特別是水相。  

2.  在梯度開始時增加初始比例平衡時間（如從5分鐘延長至10-15分鐘）。    

3.  （針對LCMS）合理設置溶劑延遲時間，避免掃描流動相初始脈沖帶來的高背景。